進出口飼料中克倫特羅、沙丁胺醇殘留量的HPLC檢測方案
“瘦肉精”是腎上腺類神經(jīng)興奮劑,屬β-興奮劑類激素,是指能夠促進瘦肉生長的藥物添加劑。目前,被稱為“瘦肉精”的藥物添加劑主要有萊克多巴胺、鹽酸克侖特羅、沙丁胺醇、硫酸沙丁胺醇、硫酸特布他林、西巴特羅、鹽酸多巴胺等。
早在2002年,我國農(nóng)業(yè)部、衛(wèi)生部、國家食品藥品監(jiān)督管理局就發(fā)布公告,明令禁止在飼料和動物飲用水中添加鹽酸克侖特羅和萊克多巴胺等7種“瘦肉精”。 但一些飼料加工企業(yè)及養(yǎng)豬飼養(yǎng)業(yè)主為謀取暴利,仍在飼料中添加 “瘦肉精”,前后只需10~20d的時間,就可把一頭普通豬催變成瘦肉型豬。如2012年4月18日又有一則題為“利欲熏心飼料中添加瘦肉精 事情敗露獲刑三年”的報道。
賽智科技應用檢測部參考出入境檢驗檢疫行業(yè)標準(SN 1116-2002-T),利用全新高性能的LC-10Tvp高效液相色譜儀經(jīng)實踐檢測可提供進出口飼料中克倫特羅、沙丁胺醇殘留量的HPLC檢測方案,得出的結果準確可靠,檢出限好,僅供廣大用戶參考。
以下是進出口飼料中克倫特羅、沙丁胺醇殘留量的測定的詳細檢測方法。
1 儀器與試劑
1.1 儀器
LC-10Tvp高效液相色譜儀
Vertex 色譜柱 150mm×4.6mm×5μm
超聲波水浴
Sep-Pak 真空抽濾裝置,帶真空泵
離心機:4000r/min
混勻器
PH計
1.2 試劑
甲醇,色譜級。
乙腈,HPLC級。
正己烷。
85%磷酸。
鹽酸溶液。
氫氧化鈉溶液。
乙酸乙酯+正丁醇溶液(6+4),用水飽和。
磷酸二氫鉀。
氨化甲醇。
陽離子交換小柱:SUPELCLEAN LC-SCX Sep-Pak小柱。
鹽酸克倫特羅標準品:純度≥99%。
沙丁胺醇標準品:純度≥99%。
2 試樣溶液的制備
2.1 提取
準確稱取試樣于離心管中,加入鹽酸-甲醇溶液,于混勻器上混勻后,置超聲波水浴中超聲,經(jīng)超聲提取后冷卻至室溫,離心,將上清液過濾到容量瓶中,殘渣用鹽酸-甲醇溶液混勻提取兩次,合并提取液,用鹽酸-甲醇溶液洗滌濾紙并定容至刻度。
2.2 凈化
定量取提取液于離心管中,加入正己烷,于混勻器上混勻,離心后,用尖嘴吸管將正己烷相去掉,共處理二次。再用 NaOH溶液調節(jié)PH值,用乙酸乙酯-正丁醇溶液提取樣液,每次混勻2min,離心后,用尖嘴吸管將上層有機相合并到另一離心管中,在(70±5)℃下,用氮氣流吹至近干,用鹽酸-甲醇溶液溶解殘渣。
將兩根SCX小柱串聯(lián)好安裝在真空抽濾裝置上,依次用甲醇、水和L鹽酸溶液處理小柱;然后將樣品提取液加到小柱上;再用鹽酸-甲醇溶液洗滌試管并一起轉移至小柱中;依次用水、甲醇淋洗小柱。在溶劑流過固相萃取柱后,保持真空抽氣狀態(tài)至少保持5min。
于真空裝置下放好刻度收集管,用氨化甲醇溶液洗脫,并收集洗脫液。將洗脫液于下,用氮氣流吹至近干,用甲醇溶解殘渣并定容,過濾膜后,供液相色譜測定。
3 色譜條件
色譜柱:Vertex 色譜柱 250mm×4.6mm×5μm;
流動相:乙腈+磷酸二氫鉀溶液
流速:1.0mL/min;
溫度:30℃;
檢測波長:215nm;
進樣量:20μL。
4 標準品色譜圖
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